在实验设计前明确抗原，保证抗体的特异性和敏感性；2.确保IgG文库中没有杂散前体抗体；3.确保抗体制备步骤干净严谨；4.确保培养基能提供足够的营养以获得正常表达的蛋白质；5.合理确定抗原和蛋白质浓度、抗原活性和其他细节；6.保证抗原蛋白的表达水平和稳定性；7.调整培养基pH和抗原浓度，保证抗体的最佳表达。
1。从经过特异性免疫的实验动物中提取B细胞。2.通过动物细胞融合将B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞。3.用特异性选择性培养基筛选能无限增殖并产生特异性的杂交瘤细胞。4.进行体内或体外培养。体内培养是指将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔，日后从腹水中提取。
Yao制备Monoclonal抗体首先需要获得具有合成特异性的单克隆B淋巴细胞抗体但这样的B淋巴细胞不能在体外生长。但发现骨髓瘤细胞可以在体外生长繁殖，通过细胞杂交技术将骨髓瘤细胞与免疫淋巴细胞结合可以获得杂交骨髓瘤细胞。这个杂交细胞继承了两个亲代细胞的特征。它既具有B淋巴细胞合成的特异性抗体又具有骨髓瘤细胞的体外持久性。使用这种来源于单一融合细胞的细胞群来培养和增殖can 制备抗一种抗原决定簇的特异性单克隆。
为了制备多克隆抗体，一般采用基于免疫球蛋白基因文库的技术。注意事项包括:1。在实验设计前明确抗原，保证抗体的特异性和敏感性；2.确保IgG文库中没有杂散前体抗体；3.确保抗体 制备步骤干净严谨；4.确保培养基能提供足够的营养以获得正常表达的蛋白质；5.合理确定抗原和蛋白质浓度、抗原活性和其他细节；6.保证抗原蛋白的表达水平和稳定性；7.调整培养基pH和抗原浓度，保证抗体的最佳表达。实验原理是通过抗原识别抗体，从而增加免疫反应的凝聚力，达到识别敏感微小物质的目的。
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