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基因测序技术,什么是基因测序

来源:整理 时间:2023-01-28 18:44:25 编辑:好学习 手机版

1,什么是基因测序

基因测序是一种新型基因检测技术,能够从血液或唾液中分析测定基因全序列,预测罹患多种疾病的可能性,个体的行为特征及行为合理。基因测序技术能锁定个人病变基因,提前预防和治疗。 基因测序相关产品和技术已由实验室研究演变到临床使用,可以说基因测序技术,是下一个改变世界的技术。

什么是基因测序

2,什么是基因测序

DNA测序的方法有很多种. 目前最常见的是双脱氧终止法了. 在测序用的缓冲液中含有四种dNTP及聚合酶. 测序时分成四个反应, 每个反应除上述成分外分别加入2,3-双脱氧的A, C, G, T核苷三磷酸(称为ddATP, ddCTP, ddGTP, ddTTP), 然后进行聚合反应. 在第一个反应物中, ddATP会随机地代替dATP参加反应一旦ddATP加入了新合成的DNA链, 由于其3位的羟基变成了氢, 所以不能继续延伸. 所以第一个反应中所产生的DNA链都是到A就终止了; 同理第二个反应产生的都是以C结尾的; 第三个反应的都以G结尾, 第四个反应的都以T结尾, 电泳后就可以读出序列了. 也许这样说你不一定明白. 举一个例子, 假如有一个DNA, 互补序列是GATCCGAT, 我们试着做一下: 在第一个反应中由于含有dNTP+ddATP, 所以遇到G, T, C三个碱基时没什么问题, 但遇到A时, 掺入的可能是dATP或ddATP, 比如已合成到G, 下一个如果参与反应的是ddATP则终止, 产生一个仅有2个核苷酸的序列: GA, 否则继续延伸, 可以产生序列GATCCG, 又到了下一个A了. 同样有两种情况, 如果是ddATP掺入, 则产生的序列是GATCCGA, 延伸终止, 否则可以继续延伸, 产生GATCCGAT. 所以在第一个反应系统中产生的都是以A结尾的片段: GA, GATCCGA, 同理在第二个反应中产生的都是以C结尾的片段: GATC, GATCC, 在第三个反应中产生的都是以G结尾的片段: G, GATCCG 在第四个反应中产生的都是以T结尾的片段: GAT, GATCCGAT, 电泳时按分子量大小排列, A反应的片段长度为2, 7; C反应的为4, 5; G反应的为1, 6; T反应的为3, 8, 四个反应的产物分别电泳, 结果为 8 7 6 5 4 3 2 1 A | | C | | G | | T | | 我们可以从右向左读, 为GATCCGAT, 至此, 测序完成

什么是基因测序

3,这句话是什么意思关于基因测序技术

上面这段话是普通二代测序(454测序法)的原理,不同的荧光信号表示不同的碱基。你说的没错,测序结果返还给客户的时候一般都有两个文件,一个是Seq,一个是ab1,其中ab1这个文件就是测序峰图,测序结果就是根据峰图确定的。你也可以自己尝试检查这个峰图,来确定有些检测是不是测出来了,但是转换错了。~.~有问题我们可以继续交流。

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4,什么是DNA测序技术

DNA测序技术,即测定DNA序列的技术。在分子生物学研究中,DNA的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等(1977)发明的双脱氧链末端终止法和 Maxam和 Gilbert(1977)发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大,但都是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生 A,T,C,G四组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测,从而获得DNA序列。目前 Sanger测序法得到了广泛的应用。http://baike.baidu.com/link?url=S8neqboyOrwW895RyI0CjFWkb6Wt2g6Hjabexm7DcZS8SDM5BR0UQex9rxvJPDkqMVO-Dk9S-PMsU4supZ5xna
bac是细菌人工染色体意思,之所以有bac文库的出现,是因为基因组序列太长,测序,以及筛选基因等没有办法完成,所以将基因组片段随机打断成片段,连到载体上构建成一系列的重组子,这样当你需要特定的序列,只需要筛选出自己要的那个bac重组子就行了。说的有点过于简单,不知道你能明白否?末端测序也是采用的双脱氧终止法的。双脱氧终止法的原理是;碱基之间是通过俩个碱基的5磷酸基团和3羟基连接的,双脱氧终止法就是利用了这个3羟基,将3羟基脱氧变成氢键,那么这样下一个碱基的5磷酸基团就没有办法连到前一个碱基上了。所以如果在做测序pcr的时候加一部分正常的dntp(3号位为羟基),加一定量的ddntp(2,3号位都是氢键),那么在第一个碱基后如果接上去的是dntp,那么就可以接着连第三个碱基,如果连得是ddntp,那么就没有办法连下个碱基形成链终止,在测序pcr中,数以万计的反应,那么就会出现2个碱基后终止的链,也有可能出现3个,4个,n个碱基后终止的链,这样就形成了一系列从一个碱基到n个碱基的序列(其最后一个碱基都是三号位为氢键的,这个应该理解吧)。那么如果我们在连上去的ddntp上连上个荧光基团(四种ddntp连上不同的荧光基团),那么将这一系列长度的链跑胶,会形成一系列的带,通过每条带最后一个碱基的荧光通过机器就能够区分是什么碱基,将这些碱基拼接好后就是你要的序列了。
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